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Calcio Reactivo DIAGNO-TEST
(Método CPC)
Diseñado para la determinación en suero y orina.
El método de calcio Diagnostest es la reacción de la cresolftaleína complexona con el calcio de la muestra para formar un complejo cromogénico que es medido fotométricamente a 575 ± 5 nm. La interferencia del magnesio se previene secuestrándolo con 8-hidroxiquinolina, mientras otros metales divalentes son enmascarados con el ión cianuro.
Se utiliza 2-Etilaminoetanol para establecer un pH de 12 y el Dimetilsulfóxido para bajar la constante dieléctrica, evitando la ionización de la cresolftaleína complexona.
Reactivos:
Reactivo N.º 1: Reactivo de Color de Calcio: Cresolftaleína complexona, hidroxiquinolina, dimetil sulfoxido y ácido clorhídrico al 0.1%.
Reactivo N.º 2: Reactivo Buffer de Calcio: 2-Etilaminoetanol y cianuro de Potasio.
Reactivo N.º 3: Patrón de Calcio: Carbonato de calcio en solución ácida de Ácido Nítrico.
Contenido:
1 frasco x 100ml de reactivo de color.
1 frasco x 100ml de reactivo Buffer.
1 frasco x 10ml de patrón de calcio.
Muestra:
Suero
Orina. Diluir 1:2 con agua destilada. (El pH no debe exceder de 6,8)
Condiciones:
Longitud de onda: 575 nm.
Temperatura: Temperatura ambiente (20-25°C).
Cero: Contra Blanco Reactivo.
Observaciones:
1- Debe usarse suero ya que la mayoría de los anticoagulantes interfieren con los métodos complexo métricos.
Una vez separado el suero de las células, el calcio es estable 8 horas a temperatura ambiente, 24 horas a 4 °C y 1 año congelados.
2- Para muestras altamente lipémicas prepara un Blanco muestra como sigue:
- a) Agregue 50 ul (0.050ml) de muestra a 4.0 ml de agua destilada.
- b) Lea la absorbancia de este Blanco Muestra contra agua destilada a 575 ±5 nm, y réstela de la absorbancia de la muestra. Use este valor corregido para calcular el valor del calcio de la muestra.
3- Si el valor ensayado excede de 15mg/dl o la capacidad lineal del aparato, repita la prueba haciendo una dilución 1:2 (multiplicando el resultado por 2)
4- La contaminación cálcica debido a detergentes se puede evitar lavando la vidriera con Acido Clorhídrico diluido al 25%. Enjuague con agua desionizada.
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